1 　实验部分

1.1 　仪器与试剂

    HP6890气相色谱仪,配备氢火焰检测器;HP7694顶空进样器;HP化学工作站;甲醇:色谱  纯;乙醇:无水乙醇,分析纯;水:纯水;氯化钠:分析纯。

1.2 　气相色谱条件

顶空进样室温度:70 ℃;定量环温度:75 ℃;输送管线温度：90 ℃;样品平衡时间:20 min;瓶加压时间:0. 4 min ;定样环平衡时间:012 min ;定样环尺寸 :1 mL ; GC 循环时间:30 min。色谱柱: HP2FFAP弹性石英毛细管柱(3010 m ×250μm ×0125μm) ;玻璃衬管 :内填适量石英棉;柱温 (起始温度):50 ℃;停留时间:10 min;升温速率:20 ℃/ min;终端温度:  180 ℃;停留时间:5 min ;检测器温度:200 ℃;进样口温度: 180 ℃; 载气:氮气 ( 9919998 %); 流 速: 4 mL/ min;尾吹 :30 mL/ min ;氢气 : 50 mL/ min ;空气: 400 mL/ min ;分流比 :10∶1 ,外标法定量。

1.3 　实验方法

准确称取210mg甲醇和210 mg乙醇于100mL容量瓶中,用0101 mol/L NaCl溶液稀释并定容至刻度,取10mL稀释至100mL作为标准。称取200mg利巴韦林于20mL的顶空样品瓶中 ,加入5mL0101mol/LNaCl溶液,摇匀,立即加盖密封,按选定条件,采用顶空进样,进行色谱分析。

2 　结果与讨论  

2.1 　色谱柱的选择  

对甲醇、乙醇分离测定方法,大多采用填充柱,但对于残留分析,填充柱的分析时间长,分离度低,所以采用弹性石英毛细管柱,试验了非极性柱HP21(聚二甲基硅氧烷)和极性柱 HP2FFAP(改性交联聚乙二醇),发现HP21柱分离时两峰分离度不及HP2FFAP,且HP21柱在甲醇位置有空白干扰,所以选用HP2FFAP作为分离柱 ,峰形好 ,灵敏度高,重现性好。  

2.2 　稀释液的选择根据利巴韦林易溶于水的特性,本研究选择水为溶液,为提高水溶液中样品分析的灵敏度,可在溶剂中加入无机盐,改变甲醇、乙醇在液相和气相中的分配系数,选择加入0101mol/L NaCl溶液,其灵敏度提高了大约5倍。

2.3 　进样系统和选择在利巴韦林的有机残留分析中,为了达到满意的分离效果,首先应让样品充分溶解,根据利巴韦林的特性,在水中的溶解性,但是 ,直接进样时 ,水不但对柱产生影响 ,缩短柱的使用寿命,且微小不溶杂质也有可能堵塞针头,造成分析困难,故选择 HP7694 顶空进样器来完成进样,不但延长了色谱柱的使用寿命,也减小了针头的清洗工作,方法的重现性也明显变好。在选定的色谱条件下分离谱图如图 1 所示。

2.4 　工作曲线和检测限  

实验表明,甲醇溶液的浓度在1103μg/ mL～3019μg/mL范围内,色谱峰面积与甲醇浓度呈线性关系,相关系数为0199954,按3倍信噪比计算,检出限为1316μg/g。乙醇溶液浓度在 1102μg/mL ～3018μg/mL 范围内,色谱峰面积与乙醇浓度呈线性关系,相关系数为 0199960,检出限为 710μg/ g。  

2.5 　回收率和精密度试验  

配制3种不同浓度的甲醇、乙醇混合液,5个样品5针,计算其含量平均值及回收率,甲醇回收率为93 %～96% ,相对标准偏差≤512%(见表1),乙醇的回收率95%～97% ,相对标准偏差≤413 % ,相对标准偏差略偏高,可能因为甲醇、乙醇易挥发,配样过程产生误差,但符合原料药残留分析的要求(RSD <10 %)。

2.6    方法应用经过对连续6批利巴韦林产品进行分析测试,结果表明,可以采用顶空进样系统的毛细管柱气相色谱分析甲醇、乙醇含量。

关键词 :利巴韦林 ;甲醇 ;乙醇 ;顶空进样 ;气相色谱